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Elisa實(shí)驗(yàn):ELISA試劑盒應(yīng)用及實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備

更新時(shí)間:2023-08-24    點(diǎn)擊次數(shù):1514

  Elisa實(shí)驗(yàn):ELISA試劑盒應(yīng)用及實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備


  ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡(jiǎn)稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。此項(xiàng)技術(shù)自70年代初問(wèn)世以來(lái),發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。

  ELISA試劑盒試劑特點(diǎn)——Elisa試驗(yàn)敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。

  ELISA試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素。

  ELISA試劑盒ELISA原理——ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,通過(guò)不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。


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  ELISA試劑盒檢測(cè)前準(zhǔn)備工作:

  1. 仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū),確定試劑盒在有效期內(nèi)。

  2. 按說(shuō)明書(shū)確定所有試劑是否齊全,完整的滬鼎ELISA試劑盒包含30倍濃縮洗滌液, 酶標(biāo)試劑,酶標(biāo)包被板,樣品稀釋液,顯色劑A液,顯色劑B液,終止液,標(biāo)準(zhǔn)品,標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,說(shuō)明書(shū),封板膜,密封袋等12個(gè)組成部分。另外要確認(rèn)試劑盒以外的材料是否齊全,如酶標(biāo)儀、移液器及吸頭、加樣槽、蒸餾水或去離子水、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī)、37°C水浴鍋或恒溫箱、EP管、稀釋用聚丙烯試管、無(wú)粉一次性乳膠手套等。

  3. 實(shí)驗(yàn)前,將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置半個(gè)小時(shí),以讓試劑恢復(fù)到室溫。

  4. 將10×的檢測(cè)緩沖液(Assay Buffer)稀釋到1×,吸取10X濃縮Assay buffer 5mL至50mL離心管,加蒸餾水至 50Ml,震蕩混勻備用。1×Assay buffer主要用于檢測(cè)抗體、HRP等濃縮液的稀釋。

  5. 將20×的洗滌液稀釋到1×,吸取20X洗液50mL至1L量筒,加蒸餾水至1000Ml,混勻,轉(zhuǎn)移至干凈容器內(nèi)備用,洗滌液用于實(shí)驗(yàn)中的洗滌步驟。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,可用37℃水浴微加熱使結(jié)晶wan全溶解后再配制洗滌液,(加熱溫度不要超過(guò)50℃)使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。

  ELISA試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。本生試劑盒

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