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ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果白板且陽(yáng)性對(duì)照不顯色原因是?
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果白板,而且陽(yáng)性對(duì)照不顯色,常見(jiàn)原因如下:
a)可能原因:漏加或者誤加試劑;
解決方法:檢查試驗(yàn)記錄和剩余試劑。每次加液前均應(yīng)核對(duì)標(biāo)簽。
b)可能原因:試劑過(guò)期;
解決方法:使用有效期內(nèi)的產(chǎn)品。
c)可能原因:洗板液配制中出現(xiàn)問(wèn)題,如量筒不干凈含HRP酶抑制物;
解決方法:使用干凈的器皿,正確配制試劑。
d)可能原因:溫育的時(shí)間或溫度不夠;
解決方法:校正溫育箱溫度。
e)可能原因:標(biāo)準(zhǔn)品失活或者丟失;
解決方法:標(biāo)準(zhǔn)品正確保存、溶解和混勻。
f)可能原因:抗體失活或者丟失;
解決方法:更換抗體或者提高抗體濃度
g)可能原因:酶失活或者丟失
檢查方法:把工作濃度的酶再稀釋20-100倍,取5uL加入50ul的顯色底物,終止后顯色是否能達(dá)到1.0左右,此為酶的粗略估計(jì)。
解決方法:更換酶或者提高酶的濃度。
h)可能原因:顯色底物失活
檢查方法:加少量的工作濃度的酶,TMB是否很快顯色。
解決辦法:更換顯色底物。
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