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ELISA實(shí)驗(yàn)中需注意事項(xiàng)及操作步驟!

更新時(shí)間:2023-06-29    點(diǎn)擊次數(shù):3960
  ELISA實(shí)驗(yàn)中需注意事項(xiàng)及操作步驟!
 
  ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)各種問題,如果能提前知道一些關(guān)于elisa實(shí)驗(yàn)的要領(lǐng)就可以正確的避免這些問題的出現(xiàn),BUNSEN本生總結(jié)問題:
 
  1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
 
  2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
 
  3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
 
  4、ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
 
  5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
 
  6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
 
  7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
 
  8、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
 
  9、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
 
  10、ELISA試劑盒對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。
 
  在ELISA試劑盒中通常有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部,防止加在孔壁上部,并留意不行濺起,不行發(fā)作氣泡。加標(biāo)本通常用微量加樣器,按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以發(fā)作穿插污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。
 
  有此測定(如間接法ELISA)需用稀的血清,可在試管中按規(guī)則的稀釋度稀釋后再加樣。也可在板孔中參加稀釋液,再在其參加血清標(biāo)本,然后在微型震動(dòng)器上震動(dòng)1分鐘以保證混和。加酶物使用液和底物用液時(shí)可用定量多道加液器,使加液進(jìn)程迅速完結(jié)。在雙抗體夾心法測定抗原時(shí),如使用對于抗原分子上兩個(gè)不一樣抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體。
 
  ELISA試劑盒則在測守時(shí)可使標(biāo)本的參加和酶標(biāo)抗體的參加兩步并作一步。這種雙位點(diǎn)一步不光簡化了操作,縮短了反應(yīng)時(shí)間,如使用高親和力的單克隆抗體,測定的敏感性和特異性也明顯進(jìn)步。單克隆抗體的使用使測定抗原的ELISA試劑盒進(jìn)步到新水平。
 
  elisa試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。
 

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