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對于ELISA試劑盒操作程序,本生詳解如下

更新時間:2023-05-06    點擊次數(shù):1175

  對于ELISA試劑盒操作程序,本生詳解如下:


  1. 分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準品孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品孔中加入標準品50μl;在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最后稀釋度為5倍)。每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。輕輕晃動混勻,37℃溫育60分鐘。


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  2. 棄去液體,甩干,每孔加滿稀釋后洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。如此重復5次,拍干。

  3. 每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

  4. 取出酶標板,每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

  5. 測定:以空白孔調(diào)零,在450nm波長下測量各孔的吸光度值(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

  6. 根據(jù)elisa試劑盒免費代測標準品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了的,其實際濃度應(yīng)該乘以總稀釋倍數(shù)。

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